放射免疫分析

放射免疫分析的基礎是放射性核種標誌的抗原和非標誌抗原〈被測抗原和標準抗原〉同時限量〈不足量〉的特異性抗體進行競爭性免疫結合反應。 基本條件:

1.特異性抗體:以被測物質為抗原住入動物體內,一定時間之後在動物血清中即可出現能與該抗原特異結合的抗體,而含有該抗體的  血清稱為抗血清。在免疫過程中,分子量越大,免疫原性越強。此外,融合瘤技術也可以製備高特異性的單株抗體。免疫動物產生  的抗血清並不一定都適合放射免疫分析測定,應選擇親和大、特異性強且濃度適當
的抗血清使用。 2.標誌抗原:用於標誌抗原的放射性核種主要有I-125、C-14和H-3。臨床上應用最多的是I-125,其γ光子的能量為35.5keV,半衰期  60.2天。被標誌的抗原要滿足放射免疫分析要求,重要的條件是比活度要高,放射化學純度佳,同時要有良好的免疫活性。
3.校正標準品:標準品是樣品定量的基礎,它的質和量的變化會直接影響樣品的測定值。對標準品的要求是:
〈1〉應與被測物屬同一種物質,其化學結構及免疫活性相同;
〈2〉高度純化,不含有影響分析的其他物質;
〈3〉定量一定要精確。 4.分離技術:在放射免疫分析中,選擇合適的分離技術將直接關係到分析結果的精密度和準確性,而理想的分離技術應不易受外界因  素干擾,分離試劑廉價易得,操作簡便,重複性好。
5.放射性測量儀器:用I-125做標誌時,使用γ井型計數器對γ射線進行放射性測量;用C-14或H-3做標誌時,則用液體閃爍計數器對  β射線進行放射性測量。配以電腦系統可對樣品自動地進行測量、數據處理及列印檢測結果。

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